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培養基(Medium)是供微生物、植物組織和動物組織生長和維持用的人工配制的養料,一般都含有碳水化合物、含氮物質、無機鹽(包括微量元素)以及維生素和水等。不同培養基可根據實際需要,添加一些自身無法合成的化合物,即生長因子。有些微生物,如自養型微生物,不需要碳源,所以上述物質只具有一般性。
高考生物必備知識點:培養基的主要特點
培養基由于配制的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方面也稍有不同。一般培養基在受熱、吸潮后,易被細菌污染或分解變質,因此一般培養基必須防潮、避光、陰涼處保存。對一些需嚴格滅菌的培養基(如組織培養基),較長時間的貯存,必須放在2~6℃的冰箱內。由于液體培養基不易長期保管,現在均改制成粉末。
高考生物必備知識點:培養基
劃分標準 | 培養基種類 | 特點 | 用途 |
物理性質 | 液體培養基 | 不加凝固劑 | 工業生產 |
半固體培養基 | 加凝固劑,如瓊脂 | 觀察微生物的運動、分類、鑒定 | |
固體培養基 | 加凝固劑,如瓊脂 | 微生物分離、鑒定、活菌計數 | |
化學組成 | 天然培養基 | 含化學成分不明確的天然物質 | 工業生產 |
合成培養基 | 培養基成分明確(用化學成分已知的化學物質配成) | 分類、鑒定 | |
目的用途 | 選擇培養基 | 培養基中加入某種化學物質,以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物的生長 | 培養、分離出特定微生物 |
鑒別培養基 | 根據微生物的代謝特點,在培養基中加入某種指示劑或化學藥品 | 鑒別不同種類的微生物 |
高考生物必備知識點:培養基的配制
1.配料
配方換算→在容器中加入少量水(蒸餾水,自然水)→按照配方稱取各種藥品(依次加入)→加足所需水量(一藥一勺,取藥后立即蓋上瓶蓋)。
2.溶解
淀粉溶解:少量冷水調成糊狀
加熱溶解,特別是加有瓊脂的培養基,一定要煮沸,瓊脂的熔解溫度95-97℃ ,且需要邊加熱邊攪拌以防止燒焦。
3.調PH
用1N的鹽酸或1N的 NaOH把培養基調節到所要求的值。
4.過濾
濾紙或棉花進行過濾。(有時可以省去)
5.分裝
一般培養基放在三角瓶或試管中滅菌使用。
(1)三角瓶
若作靜置培養,則100ml培養基/250ml的三角瓶,最多不能超過150ml培養基/250ml的
三角瓶,否則滅菌時培養基沸騰容易污染棉塞,造成染菌;若作搖瓶培養,則15-20ml培養基/250ml的三角瓶,保證通氣良好。
(2)試管分裝
液體培養基一般裝4-5ml,約試管的1/4高度;
固體斜面培養基一般裝3-4ml,約試管的1/5高度。
6.包扎
分裝好后,塞上棉塞,在用牛皮紙將棉塞包裹好,防止滅菌時水份進入把棉塞弄濕。
7.滅菌
按配方上要求的溫度、壓力進行高壓蒸汽滅菌。如果滅菌的溫度太高,營養成分會被破壞,培養
基中的糖、氨基酸會使培養基的顏色變深。
8.擺斜面
滅菌后需要擺斜面的試管要趁熱斜著擺放,使其凝固成為一個斜面,約占試管長度的1/2。
9.貯存
培養基在30℃下放置一天,無污染的即可使用。一般用牛皮紙包裹好存放于2-8℃冰箱中備用
注:1、選擇適宜的營養物質
2、營養物質濃度及配比合適
3、控制pH條件
4、控制氧化還原電位
5、原料來源的選擇
6、滅菌處理
高考生物必備知識點:選擇培養基標準
選擇培養基沒有一定標準,一般遵循以下幾點:
(1)建立某種細胞株所用的培養基應該是培養這種細胞首選的培養基;
(2)可以查閱文獻或在購買細胞株時咨詢;
(3)平常慣用的培養基;
(4)許多培養基可以適合多種細胞,根據細胞株的特點、實驗的需要來選擇培養基;
(5)用多種培養基培養目的細胞,觀察其生長狀態,可以用生長曲線、集落形成率等指標判斷;
(6)根據實驗結果選擇最佳培養基,這是最客觀的方法,但比較繁瑣。
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